西夫韦,哪位高手能帮我简述固相肽合成技术

ziyirenjiajia 你好！
多肽合成技术
多肽药物的研究与开发将作为二十一世纪高新技术竟争的主要项目之一。生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位，除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外，许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程，对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。

氨基酸彼此以酰胺键（也称肽键）相互连接的化合物称作肽。一种肽含有的氨基酸少于10个就称作寡肽，超过的就称为多肽。多肽与蛋白质只有肽链长短之别，二者间并没有严格的区分。蛋白质是生命存在的最基本形式。可见多肽是生命之"桥"，蛋白质工程从某种意义上而言就是研究多肽。

伴随着分子生学物、生物化学技术的飞速发展，多肽研究取得了惊人的、划时代的飞跃。人们发现存在于生物体的多肽有数万种，并且发现所有的细胞均能合成多肽。同时，几乎所有的细胞也都受多肽调节，它涉及激素、神经、细胞生长与生殖等各个领域，21世纪是一个多肽的世界，人们研究多肽，也渴望着将多肽应用到医疗、保健、检测等多个领域中去，为人类造福。

事实上，肽类药物开发与应用已走出科学家们的实验室，变成了现实，并发挥着其独特的功效。例如，神经紧张肽（NT）能降低血压，对肠和子宫具有收缩作用；内啡肽和脑啡肽的衍生物有着很强的镇痛作用；促甲状腺素释放激素（TRH）是一种能促进产妇乳汁分泌的多肽；能治疗糖尿病、胃溃疡、胰腺炎的多肽是一种环状的14肽；临床上常用的催产素是一种多肽；已获广泛应用的白蛋白多肽、胸腺肽、血清胸腺因子（FTS）等均可以引起免疫T细胞的分化；近日来在中国及日本已开始使用的糖肽辅助治疗肿瘤，其作用机理是使淋巴系统活化等等。应用多肽技术开发的医用蛋白质芯片（肽芯片）只有指甲盖大小，放置了与肾炎、胃溃疡和胃癌等相关的抗原分子，只要通过芯片阅读仪便可检测到有关疾病的功能状态与变异情况。其功能已相当于一个大型或中型实验室、化验室，效率是传统医学检测的成百上千倍，受检者几乎没有任何痛苦。肽芯片的广泛应用，已在医学临床检测业引发一场技术革命。

自从1963年MERRIFIELD发展成功了固相多肽合成（SPPS）方法以来，经过不断的改进和完善，到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。

固相合成的主要设计思想是：先将所要合成肽链的未端氨基酸的羧基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连，然后以此结合在固相载体上。氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基保护基，并同过量的活化羟基组分反应接长肽链。重复（缩合—洗涤—去保护—中和和洗涤—下一轮缩合）操作，达到所要合成的肽链长度；最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即得所要的多肽。

http://www.pharmco.com.cn/technical-3.htm


多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。它是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物,由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成。到现在，人们已发现和分离出一百多种存在于人体的肽，对于多肽的研究和利用，出现了一个空前的繁荣景象。
多肽的全合成不仅具有很重要的理论意义，而且具有重要的应用价值。通过多肽全合成可以验证一个新的多肽的结构；设计新的多肽，用于研究结构与功能的关系；为多肽生物合成反应机制提供重要信息；建立模型酶以及合成新的多肽药物等。
多肽的化学合成技术无论是液相法还是固相法都已成熟。近几十年来，固相法合成多肽更以其省时、省力、省料、便于计算机控制、便于普及推广的突出优势而成为肽合成的常规方法并扩展到核苷酸合成等其它有机物领域。本文概述了固相合成的基本原理、实验过程，对其现状进行分析并展望了今后的发展趋势。
1．固相合成的基本原理
多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，合成一般从C端（羧基端）向N端（氨基端）合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的，但自从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。其基本原理是：先将所要合成肽链的羟末端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连，然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组份经过脱去氨基保护基并同过量的活化羧基组分反应，接长肽链。重复（缩合→洗涤→去保护→中和和洗涤→下一轮缩合）操作，达到所要合成的肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC（叔丁氧羰基）保护的称为BOC固相合成法，α-氨基用FMOC（9-芴甲氧羰基）保护的称为FMOC固相合成法，
2． 固相合成的具体试验过程
2．1树脂的选择及氨基酸的固定
将固相合成与其他技术分开来的最主要的特征是固相载体，能用于多肽合成的固相载体必须满足如下要求：必须包含反应位点（或反应基团），以使肽链连在这些位点上，并在以后除去；必须对合成过程中的物理和化学条件稳定；载体必须允许在不断增长的肽链和试剂之间快速的、不受阻碍的接触；另外，载体必须允许提供足够的连接点，以使每单位体积的载体给出有用产量的肽，并且必须尽量减少被载体束缚的肽链之间的相互作用。用于固相法合成多肽的高分子载体主要有三类：聚苯乙烯-苯二乙烯交联树脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇类树脂及衍生物，这些树脂只有导入反应基团，才能直接连上（第一个）氨基酸。根据所导入反应基团的不同，又把这些树脂及树脂衍生物分为氯甲基树脂、羧基树脂、氨基树脂或酰肼型树脂。BOC合成法通常选择氯甲基树脂，如Merrifield树脂；FMOC合成法通常选择羧基树脂如王氏树脂。 氨基酸的固定主要是通过保护氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成的共价键来实现的，形成共价键的方法有多种：氯甲基树脂，通常先制得保护氨基酸的四甲铵盐或钠盐、钾盐、铯盐，然后在适当温度下，直接同树脂反应或在合适的有机溶剂如二氧六环、DMF或DMSO中反应；羧基树脂，则通常加入适当的缩合剂如DCC或羧基二咪唑，使被保护氨基酸与树脂形成共酯以完成氨基酸的固定；氨基树脂或酰肼型树脂，却是加入适当的缩合剂如DCC后，通过保护氨基酸与树脂之间形成的酰胺键来完成氨基酸的固定。
2．2氨基、羧基、侧链的保护及脱除
要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽，需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护，同时对氨基酸侧链上的活性基因也要保护，反应完成后再将保护基因除去。同液相合成一样，固相合成中多采用烷氧羰基类型作为α氨基的保护基，因为这样不易发生消旋。最早是用苄氧羰基，由于它需要较强的酸解条件才能脱除，所以后来改为叔丁氧羰基（BOC）保护，用TFA（三氟乙酸）脱保护，但不适用含有色氨酸等对酸不稳定的肽类的合成。1978年，chang Meienlofer和Atherton等人采用Carpino报道的Fmoc(9-芴甲氧羰基)作为α氨基保护基，Fmoc基对酸很稳定，但能用哌啶-CH2CL2或哌啶-DMF脱去，近年来，Fmoc合成法得到了广泛的应用。 羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法，可通过皂化除去或转变为肼以便用于片断组合；叔丁酯在酸性条件下除去；苄酯常用催化氢化除去。 对于合成含有半胱氨酸、组氨酸、精氨酸等带侧链功能基的氨基酸的肽来说，为了避免由于侧链功能团所带来的副反应，一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。保护基的选择既要保证侧链基团不参与形成酰胺的反应，又要保证在肽合成过程中不受破坏，同时又要保证在最后肽链裂解时能被除去。如用三苯甲基保护半胱氨酸的S-，用酸或银盐、汞盐除去；组氨酸的咪唑环用2,2,2-三氟-1-苄氧羰基和2,2,2-三氟-1-叔丁氧羰基乙基保护，可通过催化氢化或冷的三氟乙酸脱去。精氨酸用金刚烷氧羰基（Adoc）保护，用冷的三氟乙酸脱去。
2．3成肽反应
固相中的接肽反应原理与液相中的基本一致，将两个相应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸放在溶液内并不形成肽键，要形成酰胺键，经常用的手段是将羧基活化，变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的失去剂（如碳二亚氨）形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。其中选用DCC、HOBT或HOBT/DCC的对称酸酐法、活化酯法接肽应用最广。
2．4 裂解及合成肽链的纯化 BOC法用TFA+HF裂解和脱侧链保护基，FMOC法直接用TFA，有时根据条件不同，其它碱、光解、氟离子和氢解等脱保护方法也被采用。合成肽链进一步的精制、分离与纯化通常采用高效液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等。
3．固相合成的特点及存在的主要问题
固相合成法对于肽合成的显著的优点：简化并加速了多步骤的合成；因反应在一简单反应器皿中便可进行，可避免因手工操作和物料重复转移而产生的损失；固相载体共价相联的肽链处于适宜的物理状态，可通过快速的抽滤、洗涤未完成中间的纯化，避免了液相肽合成中冗长的重结晶或分柱步骤，可避免中间体分离纯化时大量的损失；使用过量反应物，迫使个别反应完全，以便最终产物得到高产率；增加溶剂化，减少中间的产物聚焦；固相载体上肽链和轻度交联的聚合链紧密相混，彼此产生一种相互的溶剂效应，这对肽自聚集热力学不利而对反应适宜。 固相合成的主要存在问题是固相载体上中间体杂肽无法分离，这样造成最终产物的纯度不如液相合成物，必需通过可靠的分离手段纯化。
4．固相合成的研究发展前景
固相多肽合成已经有40年的历史了，然而到现在，人们还只能合成一些较短的肽链，更谈不上随心所欲地合成蛋白质了，同时合成中的试剂毒性，昂贵费用，副产物等一直都是令人头痛的问题，而在生物体内，核糖体上合成肽链的速度和产率都是惊人的，那么，是否能从生物体合成蛋白质的原理上得到一些启发，应用在固相多肽合成（树脂）上，这是一个令人感兴趣的问题，也许是今后多肽合成的发展。
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绍兴市上虞宇安消防器材有限公司是2006-03-29在浙江省绍兴市上虞区注册成立的有限责任公司(自然人投资或控股)，注册地址位于绍兴市上虞区百官街道江扬路80号。 绍兴市上虞宇安消防器材有限公司的统一社会信用代码/注册号是913306047864341685，企业法人陈巍琨，目前企业处于开业状态。 绍兴市上虞宇安消防器材有限公司的经营范围是：消防器材、机电设备、安防产品、劳保用品、五金、电料、建筑材料的批发、零售；消防器材制造、维修保养。在浙江省，相近经营范围的公司总注册资本为275322万元，主要资本集中在 100-1000万 和 1000-5000万 规模的企业中，共816家。本省范围内，当前企业的注册资本属于一般。 通过百度企业信用查看绍兴市上虞宇安消防器材有限公司更多信息和资讯。

绍兴市上虞良栋消防器材厂是2005-08-23注册成立的个人独资企业，注册地址位于绍兴市上虞区小越镇朱家滩村。 绍兴市上虞良栋消防器材厂的统一社会信用代码/注册号是91330604779369994J，企业法人金建良，目前企业处于开业状态。 绍兴市上虞良栋消防器材厂的经营范围是：消防器材配件、五金配件制造加工（凡涉及许可证制度的凭证经营)。本省范围内，当前企业的注册资本属于一般。 通过百度企业信用查看绍兴市上虞良栋消防器材厂更多信息和资讯。

零售商业的特点主要表现在以下三个方面： 1．交易次数频繁，交易批量小。 2．对店铺选址及店铺设计有较高的依赖度。 3．经营场所分散，经营受商圈的限制。 商业特点： 把消费品直接出售给消费者用以满足生活需要的商业。 在商品流通过程中，零售是最后的流通环节，商品经过这一环节，就从流通领域进入消费领域。在此以前，消费品不管怎样被转卖,都没有离开流通领域。 但是,零售商业并没有承担全部的零售贸易，它只是零售贸易主要的经营者，还有相当一部分消费品是通过生产者自己或生产组织所设立的流通机构直接供应给消费者的。 扩展资料： 销售对象： 零售商业出售的商品主要是消费者个人需要的生活资料，也包括机关、团体、军队、学校、企业等集体需要的生活消费品。受个人生活消费的特性所决定，它与批发商业相比，有网点多、经营规模小、每次交易量小等特点。 零售商业早在资本主义社会以前就出现，开始是在城市，以后才逐渐扩及农村。其供应方式有： ①固定供应地点，摆摊设店，称为坐商。 ②串乡走巷，流动售货，称为商贩。在城市中，这两种方式并存；在农村，则以商贩为主，只是到农村发展起集镇以后，才有坐商。 在资本主义社会中，零售商业得到了广泛发展，而且在城市中密集，形成了许多以发达的零售商业为主的繁华市区和商业街道，出现了大型的和专业化程度高的优质服务的商店，并有百货公司、超级市场、邮购公司等形式。 随着社会经济的发展和新技术革命的兴起，又出现了购物中心、电脑电视商店等。在社会主义社会中，零售商业继续得到发展。 参考资料来源：百度百科-零售商业

一、微软（英文名称：microsoft，中文简称：微软公司或美国微软公司）始建于1975年，是一家美国跨国科技公司，也是世界PC（Personal Computer，个人计算机）软件开发的先导，由比尔·盖茨与保罗·艾伦创办于1975年，公司总部设立在华盛顿州的雷德蒙德（Redmond，邻近西雅图）。以研发、制造、授权和提供广泛的电脑软件服务业务为主。 二、IBM（国际商业机器公司）或万国商业机器公司，简称IBM（International Business Machines Corporation）。总公司在纽约州阿蒙克市。1911年托马斯·沃森创立于美国，是全球最大的信息技术和业务解决方案公司，拥有全球雇员 30多万人，业务遍及160多个国家和地区。 三、戴尔（Dell），是一家总部位于美国德克萨斯州朗德罗克的世界五百强企业，由迈克尔·戴尔于1984年创立。戴尔以生产、设计、销售家用以及办公室电脑而闻名，不过它同时也涉足高端电脑市场，生产与销售服务器、数据储存设备、网络设备等。 四、英特尔是美国一家主要以研制CPU处理器的公司，是全球最大的个人计算机零件和CPU制造商，它成立于1968年，具有50年产品创新和市场领导的历史。 五、惠普（HP）是世界最大的信息科技（IT）公司之一，成立于1939年，总部位于美国加利福尼亚州帕洛阿尔托市。惠普下设三大业务集团：信息产品集团、打印及成像系统集团和企业计算机专业服务集团。 参考资料来源：百度百科-微软 参考资料来源：百度百科-IBM 参考资料来源：百度百科-戴尔 参考资料来源：百度百科-英特尔 参考资料来源：百度百科-惠普

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1． Good to the last drop．滴滴香浓，意犹未尽。（麦斯威尔咖啡）
2． Obey your thirst． 服从你的渴望。（雪碧）
3． The new digital era． 数码新时代。（索尼影碟机）
4． We lead. Others copy．我们领先，他人仿效。（理光复印机）
5． Impos*le made pos*le．使不可能变为可能。（佳能打印机）
6． Take time to indulge． 尽情享受吧！（雀巢冰激凌）
7． The relentless pursuit of perfection．不懈追求完美。（凌志轿车）
8． Poetry in motion, dancing close to me．动态的诗，向我舞近。（丰田汽车）
9． Come to where the flavor is. Marlboro Country．
光临风韵之境——万宝路世界。（万宝路香烟）
10．To me, the past black and white, but the future is always color．
对我而言，过去平淡无奇；而未来，却是绚烂缤纷。（轩尼诗酒）
11. Just do it. 只管去做。（耐克运动鞋）
12. Ask for more. 渴望无限。（百事流行鞋）
13. The taste is great. 味道好极了。（雀巢咖啡）
14. Feel the new space. 感受新境界。（三星电子）
15. Intelligence everywhere.智慧演绎，无处不在。（摩托罗拉手机）
16. The choice of a new generation.新一代的选择。（百事可乐）
17. We integrate, you communicate.我们集大成，您超越自我。（三菱电工）
18. Take TOSHIBA, take the world.拥有东芝，拥有世界。（东芝电子）
19. Let’s make thing btter.让我们做得更好。（飞利浦电子）
20. No business too small, no problem too big.
没有不做的小生意，没有解决不了的大问题。（IBM公司）
21.M&Ms melt in your mouth, not in your hand.(M&Ms) 只溶在口，不溶在手。(M&M巧克力)
22.Good to the last drop. (Maxwell) 滴滴香浓，意犹未尽。(麦氏咖啡)
23.Time is what you make of it. (Swatch) 天长地久。(斯沃奇手表)
24.Make yourself heard. (Ericsson) 理解就是沟通。(爱立信)
25.Start ahead. (Rejoice) 成功之路，从头开始。(飘柔)
26.Things go better with Coca-Cola. (Coca-Cola) 饮可口可乐，万事如意。(可口可乐)
27.Connecting People.(Nokia) 科技以人为本。(诺基亚)
28.A diamond lasts forever. (De Bierres) 钻石恒久远，一颗永流传。(第比尔斯)
29.Mosquito Bye Bye Bye. (RADAR) 蚊子杀杀杀。(雷达牌驱虫剂)
30.A Kodak Moment. (Kodak) 就在柯达一刻。(柯达相纸/胶卷)
31.校园“光棍俱乐部”——男人的世界！（金利来服饰）；
32.大学生正常消费——不买贵的，只选对的。（雕牌洗衣粉）；
33.每天有约会——精彩每一天。（雀巢咖啡）；
34.生日大聚餐——美好时光，美味共享……（麦当劳快餐）；
35.好不容易从失恋中解脱——原来生活可以更美的。（美的空调）；
36.朋友间的承诺——真诚到永远！（海尔电器）；
37.面对导师的赞赏，常说——让我们做得更好！（飞利浦电器）；
38.应付别人的指责，常说——我就是我……（雪碧饮料）；
39.九月十日写给导师的贺卡——我们的光彩，来自你的风采。（沙宣洗发水）；
40.大学生与他们的父母——沟通无极限……（康佳移动电话）；
41.一个星期突击复习，搞定所有考试——就是这样自信！（飘柔洗发水）；
42.考试作弊高手——天外有天……（红塔集团）；
43.寝室电脑无病毒——健康新概念。（LG空调）；
44.就业偏向外企——非常可乐，非常选择！（非常可乐）。